中国辽宁咽滑刃线虫的形态与分子系统学描述

编号 zgly0001730052

文献类型 期刊论文

文献题名 中国辽宁咽滑刃线虫的形态与分子系统学描述

作者 宋雅婷  刘任军  江奕  周立峰  谈家金  孙守慧  陈凤毛 

作者单位 南京林业大学  沈阳市森林资源监测中心  沈阳农业大学林学院 

母体文献 南京林业大学学报:自然科学版 

年卷期 2020,44(4)

页码 93-101

年份 2020 

分类号 S763 

关键词 线虫  形态学  系统发育  核糖体RNA  新种  分类鉴定  咽滑刃属 

文摘内容 【目的】2018年7月自辽宁省沈阳市枯死华山松(Pinus armandii Franch.)体内分离得到一种非常见的线虫,经光学显微镜初步观察到该线虫在枯死松树内种群单一且数量较多,为研究其与松树枯萎的关系,从形态学和分子生物学特征对该线虫进行系统的描述说明,以确定该线虫的种属,更好地进行线虫的鉴定与分类,并对咽滑刃属线虫的数据库进行补充,便以期为松树枯萎病的相关研究提供理论参考。【方法】将采集到的华山松枯死木样品劈成1 cm(长)×1 cm(宽)的薄片,采用贝尔曼漏斗法在室温条件下分离8~12 h后收集线虫液,于光学显微镜下观察。同时将分离到的线虫用4%的甲醛溶液浸泡法杀死并立即固定,制作永久玻片。将一定数量的线虫用无菌水漂洗3次后移入长满灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar)培养基中,置于培养箱25℃暗培养7 d后可得到大量线虫。利用光学显微镜观察拍摄雌成虫和雄成虫的形态特征,采用De Man公式进行形态测计,并依据特征绘制出墨线图。扫描电子显微镜则用于观察线虫的侧区、唇区、阴门区、尾尖突等部位处的细微差别。提取线虫DNA并对其18S和28S D2—D3进行片段扩增、克隆和测序,多基因串联构建进化树,通过Bootstrap值分析聚类可靠性。经系统的形态学观察、测计以及分子生物学系统发育分析对该线虫进行种类鉴定。【结果】该线虫能以真菌为食,主要形态特征为雌虫体长1252~1722μm,角质层具环纹;唇区圆形,缢缩明显;口针长12~16μm,具有明显的基部球;中食道球长卵圆形近圆形,瓣膜清晰;排泄孔通常位于中食道球后方;食道腺长叶状,从背面覆盖肠;卵巢前伸,卵母细胞呈单行排列;侧线数量为4,具阴门盖;尾部具单个茎状末端,附两个梗节,分别具4~6个端缘指状突起;雄虫体长略短,为972~1383μm,体前部特征与雌虫相似;单精巢?