含hup基因的质粒在催娩克氏杆菌中的稳定性及吸氢酶的表达

编号 zgly0001241828

文献类型 期刊论文

文献题名 含hup基因的质粒在催娩克氏杆菌中的稳定性及吸氢酶的表达

作者 黄黎  梁建光  吴永强 

作者单位 中国科学院上海植物生理研究所!上海200032 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2001年01期

年份 2001 

分类号 Q786 

关键词 催娩克氏杆菌  质粒稳定性  吸氢酶活性  吸氢酶基因 

文摘内容 以质粒 pKT2 30为载体 ,亚克隆大豆根瘤菌吸氢酶结构基因 (hupSL )片段 ,构建成嵌合质粒pKH1。将质粒分配系统基因 ( parDE)片段和吸氢酶结构基因 (hup )片段插入载体质粒pRK415 ,构建成质粒 pRKBH。质粒 pKH1、pRKBH和载体 pRK415经转化和三亲本杂交 ,得到DH5α/pHR11、DH5α/pRKBH、E12 0 1/pKH1、NG13/pKH1(NGH999)、NG1390 /pRK415、NG1390 /pHR11、NG1390 /pRKBH和NG1390 /pKH1(NGH982 )等接合子。稳定性分析发现 ,质粒 pKH1在催娩克氏杆菌中传 80代后仍有92 %以上的菌株含此质粒 ,说明质粒 pKH1有较高的稳定性。吸氢酶活性分析表明 ,H2 诱导接合子NGH999和NGH982吸氢酶活性高表达 ,同时固氮效率和固氮酶活性也高。低碳源浓度更有利于接合子吸氢酶活性的表达和固氮效率的提高。接合子NGH982具有耐铵的基因 ,因此其固氮酶活性的表达有部分去铵阻遏的作用