蓝细菌6803 agp基因的分子克隆和缺失突变株的构建(英文)

编号 zgly0001241561

文献类型 期刊论文

文献题名 蓝细菌6803 agp基因的分子克隆和缺失突变株的构建(英文)

作者 吴桂芳  沈忠耀  吴庆余  赵南明 

作者单位 清华大学生物科学与技术系!北京100084  清华大学化工系生物化工研究所  北京100084  清华大学化工系生物化工研究所!北京100084 

母体文献 植物学报 

年卷期 2001年05期

年份 2001 

分类号 Q75 

关键词 蓝细菌  集胞藻6803  agp基因克隆  缺失突变  糖原合成  光合作用 

文摘内容 PCR扩增了蓝细菌集胞藻 6 80 3 (Synechocystissp .PCC 6 80 3)的agp基因 (编码ADP_葡萄糖焦磷酸羧化酶 ) ,进一步以pUC118为载体将其克隆到大肠杆菌中 ,构建了pUCA质粒。通过DNA体外重组 ,以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段 ,构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记———红霉素抗性的pUCAE质粒。该质粒转化野生型集胞藻 6 80 3细胞 ,获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的agp基因缺失突变株。对该突变株基因组DNA进行PCR扩增 ,验证了其基因结构的正确性。突变株细胞生长速度较野生型细胞快 ,胞内的叶绿素含量比野生型细胞高 ,表明该突变株具有较高的光合效率。在突变株中未检测到糖原的存在 ,进一步从生理水平上验证了突变株构建的正确性。