番茄褪绿病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

编号 zgly0001651817

文献类型 期刊论文

文献题名 番茄褪绿病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

作者 孙晓辉  高利利  刘锦  王少立  乔宁  刘永光  赵静  竺晓平 

作者单位 山东农业大学植物保护学院山东省蔬菜病虫生物学重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心  荣成市港湾街道办事处  潍坊科技学院 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S436.412.11 

关键词 番茄褪绿病毒  SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR  病毒检测 

文摘内容 根据番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）热激蛋白70（Hsp70）的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物。利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量方法。针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化。结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3μmol·L-1。熔解曲线为特异性单峰,表明其特异性良好。建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR较常规PCR灵敏100倍,且具有良好的重复性和稳定性。基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术建立的ToCV检测方法,速度快、特异性强、灵敏度高、重复性好,可以用于ToCV的定量检测。