HarpinXooc蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测

编号 zgly0001338889

文献类型 期刊论文

文献题名 HarpinXooc蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测

作者 何丹  刘俊  高学文  沈波 

作者单位 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点实验室  南京农业大学农业部病虫监测与治理重点实验室 南京210095  南京210095 

母体文献 中国生物防治 

年卷期 2008年01期

年份 2008 

分类号 Q78 

关键词 毕赤酵母  HarpinXooc蛋白  生物活性检测 

文摘内容 采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌RS105菌株中扩增harpinXooc编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵上清液经浓缩后进行SDS-PAGE电泳分析,在约18kD处有特异目标条带出现。Western blot检测表明表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明酵母重组表达蛋白harpinXooc能够诱导烟草产生过敏反应和促进烟草生长,活性高于在大肠杆菌中表达的harpinXooc。