ETEC K88菌毛蛋白抗体PPA-ELISA检测方法的建立

编号 zgly0001423180

文献类型 期刊论文

文献题名 ETEC K88菌毛蛋白抗体PPA-ELISA检测方法的建立

作者 李书光  李峰  苗立中  张娜  肖跃强  陈金龙  孙翠平  沈志强 

作者单位 山东省滨州畜牧兽医研究院  山东绿都生物科技有限公司 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2012年06期

年份 2012 

分类号 S858.28 

关键词 产肠毒素大肠埃希菌  K88  辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验 

文摘内容 以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原,建立了检测大肠埃希菌K88IgG抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA的最适反应条件,即最佳抗原包被浓度为1μg/mL,兔抗体稀释倍数为1∶10,猪抗体稀释倍数为1∶100,确定最佳封闭液为50g/L脱脂奶粉,最佳封闭时间为0.5h,血清反应时间0.5h,二抗反应时间1h,底物室温反应时间为15min,阴阳性临界值兔血清为0.33、猪血清为0.45。证实该间接PPA-ELISA方法特异性强、重复性好、敏感度高,可以作为疫苗效力检验和流行病学调查的参考方法。