山羊痘和小反刍兽疫病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

编号 zgly0001449009

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊痘和小反刍兽疫病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者 赵文华  杨仕标  高华峰 

作者单位 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室/云南省畜牧兽医科学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年10期

年份 2013 

分类号 S855.3 

关键词 山羊痘病毒  小反刍兽疫病毒  实时荧光定量RT-PCR  探针 

文摘内容 为实现对山羊痘病毒(GTPV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及PPRV的M基因,分别设计合成两套特异性引物及探针;探针分别用5′-FAM-TAMRA-3′及5′-JOE-Eclipse-3′标记物进行标记以实现同步检测。结果显示,所建立的ITR-M二联探针荧光定量RT-PCR方法可同时特异性检测GTPV和PPRV产生特异性荧光信号,而对禽痘病毒、犬瘟热病毒等相关病毒无荧光信号可检出。以GTPV-ITR和PPRV-M的pMD-18T载体质粒为标准品,构建了双重标准曲线,ITR-M探针的检测敏感度可分别达103拷贝/μL及101.2拷贝/μL cDNA。本研究初步建立了可同步快速检测GTPV和PPRV的二联实时荧光定量RT-PCR法。