双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达

编号 zgly0000481645

文献类型 期刊论文

文献题名 双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达

学科分类 220.1510;林木育种学

作者 杨敏生  李志兰  王颖  王进茂  梁海永 

作者单位 河北农业大学  中国林业科学研究院亚热带林业研究所  中国热带农业科学院热带生物技术研究所 

母体文献 林业科学 

年卷期 2006,42(9)

页码 61-68

年份 2006 

分类号 S722.36 

关键词 三倍体毛白杨  双抗虫基因  遗传转化  抗虫性 

文摘内容 建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 mg·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18%,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系。PCR检测表明: 80%的植株呈现阳性反应,部分株系进行Southern Blot检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中。用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明: 7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0.016 1%.用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明: 不同株系幼虫杀死率明显不同,有39.3%的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80%以上;25.0%的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60%～80%之间;另有35.7%的株系幼虫死亡率在50%以下,有些株系基本未表现出抗虫性。同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育。