多花胡枝子基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

编号 zgly0000337927

文献类型 期刊论文

文献题名 多花胡枝子基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张吉宇  袁庆华  张文淑  鲁挺 

作者单位 兰州大学草地农业科技学院甘肃草原生态研究所 

母体文献 草地学报 

年卷期 2004,12(3)

页码 219-222,230

年份 2004 

分类号 Q943  S541.5 

关键词 草原学  多花胡枝子  DNA提取  RAPD 

文摘内容 以多花胡枝子干种子、萌发种子及开花期叶片三种材料提取基因组DNA, 其中开花期叶片用CTAB法提取、干种子和萌发种子用SDS法提取的DNA均用于RAPD研究。结果表明, 叶片基因组DNA的RAPD扩增最佳反应体系是: DNA模板用量为75ng, Mg^2+浓度2.1mmol/L, dNTP浓度200μmol/L, 随机引物浓度为0.2pm/μL, 10×buffer2.5uL, TaqDNA聚合酶1.5个单位, 反应总体积25uL; 扩增反应程序: 94℃预变性3min; 94C变性30S, 36℃退火30S, 72C延伸1min, 循环45次, 72℃延伸10min。