抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立

编号 zgly0000480627

文献类型 期刊论文

文献题名 抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立

作者 王自良  王建华  杨艳艳  杨继飞  张海棠  范国英  张改平 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  河南科技学院动物科学学院  河南省动物免疫学重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2006,34(5)

页码 6-12

年份 2006 

分类号 S859.84 

关键词 氯霉素  细胞融合  单克隆抗体  胶体金免疫层析试验  快速检测试纸 

文摘内容 以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备CAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1: 1 280,腹水为1: 640 000,亲和常数(Ka)为1.84×10^10L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0.88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。