条件化转染MT基因小鼠模型的建立

编号 zgly0000407073

文献类型 期刊论文

文献题名 条件化转染MT基因小鼠模型的建立

作者 王延安  郑家伟  费照亮  蒋欣泉  李金忠  徐骎  王铸钢  费俭  张志愿 

作者单位 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科  上海南方模式生物研究中心 

母体文献 中华医学遗传学杂志 

年卷期 2006,23(3)

页码 260-264

年份 2006 

分类号 R730.2 

关键词 转基因  四环素诱导调控系统  显微注射  动物模型  多瘤病毒  血管瘤  小鼠  模型建立 

文摘内容 目的建立四环素诱导调控的MT转基因小鼠模型。为血管瘤试验研究及MT致瘤机理研究奠定基础。方法通过PCR方法从鸡的基因组序列中克隆绝缘子元件; 构建四环素诱导调控的条件化转基因质粒, 并将其调控元件和受控元件串联成一个载体, 在两元件之间插入绝缘子, 以减轻两者之间的相互干扰。为提高转基因的表达效率, 在转基因盒的上游亦插入绝缘子元件; 将MT基因亚克隆至此载体; 转基因载体功能行细胞瞬转试验及半定量逆转录-PCR验证后, 将其在体外扩增、酶切、回收, 行小鼠受精卵原核注射, 获得转染MT基因阳性小鼠; 强力霉素体外诱导部分阳性鼠MT基因表达, 使其具有血管瘤表型。结果绝缘子元件成功克隆; 成功构建条件化转基因载体; 体外试验证实目的基因的表达受强力霉素的严格调控; 通过原核注射, 获得5只转基因阳性鼠; 2只行体外诱导2月后。1只出现血管瘤表型, 逆转录。PCR检测证实MT表达。其余3只阳性小鼠在传代建系中。结论条件化MT转基因小鼠模型成功构建, 此小鼠模型能够为血管瘤的试验研究及MT致瘤机理的体内研究提供一定的基础。