银杏雌树成熟叶cDNA文库的构建

编号 zgly0000631836

文献类型 期刊论文

文献题名 银杏雌树成熟叶cDNA文库的构建

学科分类 220.45;经济林学

作者 王义强  谭晓风  陈介南  周小慧  孙吉康 

作者单位 中南林业科技大学经济林栽培育种国家林业局重点实验室  中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所  中南林业科技大学生命科学与技术学院 

母体文献 中南林业科技大学学报：自然科学版 

年卷期 2009,29(1)

页码 6-9,31

年份 2009 

分类号 S727.3 

关键词 经济林学  cDNA文库  构建  银杏  雌树  成熟叶 

文摘内容 银杏是第四纪冰川时期孑遗的现存地球最古老的植物，为我国特有的经济树种，银杏cDNA文库的构建有助于其分子生物学研究进一步深入．以湖南银杏梅核品种优良单株成熟叶为材料，经变性裂解液分解细胞，提取总RNA，Oligotex mRNA midi kit分离纯化出mRNA，用SuperScipt TM Ⅱ RnaseH2 Reverse Transcriptase将其反转录成cDNA，与EcoRI接头连接后插入pBluescript Ⅱ SK（＋）XR载体，电转化感受态细胞DH10B中，进行菌落PCR文库质量检测．结果表明：文库总库容量为8．12×10^5克隆子，重组率为90％，文库插入片段长度约为500～2000bp．构建的银杏雌树成熟叶cDNA文库符合标准，该文库为进一步构建银杏EST文库、筛选目的基因及基因芯片制备等提供了资源基础和有效工具．