日本落叶松谷胱苷肽还原酶的生化特性研究

编号 zgly0000817692

文献类型 期刊论文

文献题名 日本落叶松谷胱苷肽还原酶的生化特性研究

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 王鑫  钱婷婷  曾庆银 

作者单位 中国科学院植物研究所 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2013(F10)

页码 25-32

年份 2013 

分类号 S791.223 

关键词 日本落叶松  谷胱苷肽还原酶  表达模式  亚细胞定位  酶学性质 

文摘内容 本研究从日本落叶松中克隆到一个谷胱苷肽还原酶(GR)基因, 命名为LaGR。该基因编码563个氨基酸组成的蛋白质, 预测分子量为61.06kDa。表达模式分析发现LaGR基因在芽、成熟针叶、茎韧皮部和根韧皮部均表达, 是组成型表达基因。蛋白质亚细胞定位研究发现LaGR蛋白定位在叶绿体。在大肠杆菌中表达并纯化了LaGR重组蛋白。酶学性质分析发现, LaGR蛋白对底物GSSG和NADPH具有较高的催化活性和亲和力, 是热稳定蛋白, 而且最适pH值范围在7.0～9.0之间。Cd2+、Pb2+和Cu2+等重金属离子对LaGR蛋白的催化活性具有明显的抑制作用。将LaGR蛋白的第528位His突变为Gin后, 其突变蛋白的催化活性显著降低, 而且与野生型LaGR蛋白相比, 突变蛋白的动力学常数、最适pH值范围和热稳定性均发生了显著变化, 预示着第528位的His在LaGR的催化特性和蛋白结构稳定性方面发挥着重要作用。