芒果(Mangifera indica)RCCR基因的克隆及其基因沉默载体的构建

编号 zgly0001635102

文献类型 期刊论文

文献题名 芒果(Mangifera indica)RCCR基因的克隆及其基因沉默载体的构建

作者 刘宽亮  赵志常  高爱平  黄建峰  党志国  罗睿雄  陈业渊 

作者单位 海南大学热带农林学院  中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点开发实验室  国家热带果树品种改良中心 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年10期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S667.7 

关键词 芒果  RCCR  叶绿素降解  病毒诱导的基因沉默(VIGS) 

文摘内容 红色叶绿素降解产物还原酶(red chlorophyll catabolite reductase,RCCR)是叶绿素降解过程的关键酶,能将叶绿素降解过程中产生的红色叶绿素代谢物(Red chl catabolit)分解代谢为原初荧光叶绿素降解产物(Primary fluorescent chl catabolite)。本研究根据转录组测序得到RCCR部分片段信息设计简并引物,采取3’和5’cDNA末端快速克隆(RACE)的技术方法,分别在三个不同着色芒果品种(红色‘贵妃’品种,黄色‘金煌’品种,绿色‘桂七’品种)中进行RCCR基因全长cDNA序列的扩增克隆得到了芒果果皮RCCR基因的全长cDNA序列。结果发现三个着色品种cDNA序列只有几个碱基的差异,以黄色金煌品种为例分析可得全长cDNA序列为1 134 bp,开放阅读框为975 bp,编码324个氨基酸,分子重量为36.21 k D,等电点为5.13。通过生物软件预测得到了三种三级蛋白结构图。对NCBI上刊载的30种不同植物构建系统发育树发现该基因编码的蛋白与橙子、克莱门柚等水果植物的亲缘关系比其他植物物种的亲缘关系近。近年来,病毒诱导的基因沉默(VIGS)是研究植物基因功能的有力工具,为深入探究RCCR基因在叶绿素降解中的作用,本研究成功构建出RCCR-pTRV2基因沉默载体,为后续研究RCCR基因在芒果果实成熟及果皮着色过程中的作用机理提供理论依据。