供体细胞来源和TSA处理对牦牛iSCNT胚胎重编程的影响

编号 zgly0000807318

文献类型 期刊论文

文献题名 供体细胞来源和TSA处理对牦牛iSCNT胚胎重编程的影响

作者 熊显荣  高川  符梅  李键  字向东  钟金城 

作者单位 西南民族大学生命科学与技术学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(10)

页码 9-14

年份 2012 

分类号 Q813.7 

关键词 牦牛  异种核移植  胚胎发育  去乙酰化酶2基因 

文摘内容 【目的】:探讨不同来源的供体细胞和TSA处理对牦牛异种体细胞核移植(Interspecies nuclear transfer, iSCNT)胚胎的影响。【方法】:以黄牛卵母细胞为受体, 分别以牦牛50日龄胎儿及6和18月龄个体成纤维细胞为供体, 构建牦牛iSCNT胚胎, 研究供体细胞来源对牦牛iSCNT胚胎的影响。分别用0(对照), 20, 40, 60和80 nmol/L的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞12 h, 构建iSCNT胚胎, 比较其发育情况, 确定TSA的最佳处理浓度; 用最佳浓度的TSA处理50日龄胎儿成纤维细胞0(对照), 6, 12和18 h, 构建iSCNT胚胎, 比较其发育情况, 确定TSA的最佳处理时间。用最佳TSA作用时间和浓度处理供体细胞, 构建牦牛iSCNT, 之后用40和80 nmol/L的TSA分别处理iSCNT胚胎6 和12 h, 比较不同处理方式对牦牛iSCNT胚胎发育的影响。采用qRT-PCR方法检测40 nmol/L TSA处理供体细胞6 h 的iSCNT胚胎及40 nmol/L TSA处理供体细胞6 h且处理iSCNT胚胎12 h的iSCNT胚胎去乙酰化酶2(HDAC2)基因mRNA的表达水平, 以不进行TSA处理的iSCNT胚胎为对照。【结果】:以50日龄胎儿成纤维细胞作为供体细胞, 牦牛iSCNT胚胎的囊胚率最高, 但与其他组差异不显著(P>0.05)。40 nmol/L TSA处理供体细胞6 h能显著提高牦牛iSCNT胚胎的囊胚率(30.6%), 且与对照组差异显著(P<0.05)。用40 nmol/L TSA处理牦牛iSCNT胚胎12 h组的囊胚率高于80 nmol/L TSA处理iSCNT胚胎6 h组, 2组间差异不显著(P>0.05)。用TSA处理供体细胞和iSCNT胚胎之后, HDAC2 mRNA表达水平降低, 且与对照组差异显著(P<0.05)。【结论】:不同来源的供体细胞对iSCNT胚胎发育的影响不明显; 40 nmol/L TSA处理供体细胞6 h和iSCNT胚胎12 h能显著提高牦牛iSCNT胚胎体外发育及重编程能力。