CryⅢA基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化

编号 zgly0001624675

文献类型 期刊论文

文献题名 CryⅢA基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化

作者 尤佳  张宁  文义凯  吴家和  司怀军  王蒂 

作者单位 甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室  甘肃农业大学生命科学技术学院  中国科学院微生物研究所植物基因组学国家重点实验室 

母体文献 草业学报 

年卷期 2014年01期

年份 2014 

分类号 Q943.2 

关键词 In-Fusion  CryⅢA基因  表达载体  马铃薯  遗传转化 

文摘内容 利用In-Fusion技术将酶切位点不匹配、目的基因内部含载体酶切位点的CryⅢA基因和植物表达载体pBI121相连接,分别成功构建了组成型启动子CaMV 35S和马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA基因植物表达载体。利用冻融法将2个重组质粒转入根癌农杆菌LBA4404,转化马铃薯栽培品种陇薯3号和甘农薯2号获得了转化植株,经卡那霉素筛选和PCR检测,共有10株阳性植株CryⅢA基因成功整合到马铃薯基因组中。经实时荧光定量PCR检测表明,CryⅢA基因在CaMV 35S驱动的CryⅢA转基因植株的根、茎、叶中均有表达,且在叶中表达量较高,茎和根次之;在马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA转基因植株中,在根中未见表达,仅在茎、叶中表达,且在叶中表达量较高。