果蝇抗菌肽基因(Andropin)的原核表达与活性分析

编号 zgly0001376388

文献类型 期刊论文

文献题名 果蝇抗菌肽基因(Andropin)的原核表达与活性分析

作者 刘变芳  郭蔼光  金伟波  范三红 

作者单位 西北农林科技大学食品科学与工程学院  西北农林科技大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年07期

年份 2010 

分类号 Q78 

关键词 果蝇  抗菌肽  基因融合表达  大肠杆菌  抗菌活性 

文摘内容 【目的】克隆果蝇抗菌肽Andropin基因,以期利用原核表达系统生产高活性抗菌肽。【方法】首先化学合成了目的基因的2个片段和1对引物,然后利用重叠区互补PCR法得到抗菌肽Andropin的全基因序列。构建了融合表达载体pET32a-Anp,并转入感受态细胞OrigammiB进行原核融合表达。重组菌株诱导表达后,用His-Tag Purification kit亲和层析柱纯化融合蛋白,纯化的蛋白用肠激酶切割并进行活性分析。【结果】在诱导温度37℃、1mmol/LIPTG诱导培养4h的条件下,可获得高效表达的融合蛋白;融合蛋白的表达量占总蛋白的30%,分子质量约为28ku,可溶性达70%以上;抗菌活性试验表明,表达产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用。【结论】重组工程菌表达得到Andropin的融合抗菌肽,且其具有抗菌生物学活性。