莲SRAP-PCR反应体系的优化与建立

编号 zgly0001435351

文献类型 期刊论文

文献题名 莲SRAP-PCR反应体系的优化与建立

作者 杨美  徐立铭  刘艳玲 

作者单位 中国科学院水生植物与流域生态重点实验室中国科学院武汉植物园 

母体文献 植物科学学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S682.32 

关键词 莲  SRAP  PCR反应体系  优化 

文摘内容 以中国古代莲(Nelumbo nucifera)和美洲黄莲(N.lutea)为材料,利用单因素分析法对影响莲SRAP-PCR扩增效果的模板、Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物浓度进行了探索和研究。获得了能稳定扩增莲基因组的SRAP-PCR最佳10μL反应体系:模板DNA浓度为50 ng、1μL 10×Buffer、MgCl2浓度为2 mmol/L、dNTPs浓度为0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.75 U、正反向引物浓度均为0.8μmol/L。为检测该优化体系的稳定性,进一步选取16对引物组合对88份花莲核心种质进行PCR扩增,获得了183条清晰的谱带,其中165条具有多态性,比率为90%,说明建立的莲SRAP反应体系是稳定可靠的。莲SRAP-PCR反应体系的优化和建立,为利用SRAP标记技术深入开展莲的遗传多样性评价、遗传连锁图构建和分子辅助育种等研究提供成熟的技术体系支撑。