津田芜菁直根皮cDNA文库的构建及ESTs测序质量的分析

编号 zgly0000379815

文献类型 期刊论文

文献题名 津田芜菁直根皮cDNA文库的构建及ESTs测序质量的分析

作者 许志茹  李玉花  杨传平 

作者单位 东北林业大学 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2005,33(2)

页码 18-19,37

年份 2005 

分类号 Q503  Q78 

关键词 芜菁  直根  cDNA文库  EST  测序 

文摘内容 利用Trizol法从津田芜菁中提取总RNA, 分离纯化富含Poly(A)’的mRNA, 反转录合成双链cDNA, 并以λ-ZAP为载体, 构建了津田芜菁cDNA文库。以XL1-Bluc为受体菌, 测定原始文库的滴度为4.3×10^6pfu/mL, 重组率为96%, 扩增后文库总滴度为6×10^10pfu/mL。对随机提取的质粒进行PCR鉴定, 表明插入片段大多分布在0.5～2.0kb之间。文库质量鉴定结果表明, 构建的津田芜菁直根皮cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。对3020个克隆的序列测定表明, 获得可用序列2718个, 测序成功率为90%, 首批共获得652个芜菁直根皮ESTs。