文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立

编号 zgly0000792483

文献类型 期刊论文

文献题名 文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立

作者 刘昭军  张胜  赵忠  张博勇  宗建伟 

作者单位 西北农林科技大学林学院  西北农林科技大学西部环境与生态教育部重点实验室 

母体文献 西北林学院学报 

年卷期 2012,27(3)

页码 55-61

年份 2012 

分类号 S718.43 

关键词 文冠果  韧皮部  蛋白质提取方法  蛋白质裂解液  双向电泳技术 

文摘内容 以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化。结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰;样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度。在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度。等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80 000Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少。