银杏小孢子叶球蛋白提取和双向电泳体系优化(Ⅱ)

编号 zgly0000734935

文献类型 期刊论文

文献题名 银杏小孢子叶球蛋白提取和双向电泳体系优化(Ⅱ)

学科分类 220.45;经济林学

作者 杨妮娜  崔彬彬  孙宇涵  李允菲  王亚茹  陈欣  李云  邓高松  苗少波 

作者单位 北京林业大学  保定学院  北京林业大学实验林场 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2011,39(8)

页码 55-57

年份 2011 

分类号 S792.95 

关键词 银杏  TCA/丙酮/酚  双向电泳技术 

文摘内容 以银杏小孢子叶球为材料, 比较了不同的提取的方法、蛋白质裂解液组成、pH值范围以及不同质量浓度SDS—PAGE凝胶对双向电泳的影响。结果表明: TCA/丙酮/酚法比TCA/丙酮法更适合于银杏小孢子叶球蛋白的提取; 含有硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ, 可显著提高蛋白质的溶解性, 在2-DE图谱上可分辨出748个蛋白质点, 比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白点数多620个。采用pH3—10的胶条分离时, 蛋白点集中在pH=4～8,使用pH=4—7的胶条, 图谱胶点重叠少, 也较清晰, 更利于低丰度蛋白的检出。用TCA/丙酮/酚提取蛋白, 并以蛋白质裂解液Ⅱ溶解蛋白, 采用pH=4—7线性17cm的IPG胶条, 12%SDS—PAGE凝胶进行双向凝胶电泳, 银杏小孢子叶球蛋白质能得到较好的分离, 图谱清晰。