VIGS沉默CaCYC1基因对喜树叶片中喜树碱合成的影响

编号 zgly0001693870

文献类型 期刊论文

文献题名 VIGS沉默CaCYC1基因对喜树叶片中喜树碱合成的影响

作者 万如意  丛云寒  姜珊珊  金朝霞 

作者单位 大连工业大学生物工程学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2020年01期

年份 2020 

分类号 S567.19 

关键词 喜树(CamptothecaacuminataDecne)  喜树碱  病毒诱导的基因沉默  瞬时沉默  环烯醚萜合酶 

文摘内容 喜树是一种具有药用价值的木本植物,其主要次级代谢产物喜树碱具有良好的抗癌功效。本研究主要通过病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing, VIGS)技术对喜树碱生物合成途径中的关键酶基因CaCYC1环烯醚萜合酶(Camptotheca acuminata iridoid synthase, CaCYC1)进行瞬时沉默,进而研究该基因对喜树碱生物合成的影响。以喜树叶片总RNA为模板,通过RT-PCR技术克隆CaCYC1基因片段并构建TRV-VIGS重组质粒,转化农杆菌GV3101后侵染喜树叶片,培养20 d后利用qRT-PCR与HPLC技术分析沉默对CaCYC1基因转录水平及喜树碱合成的影响。结果表明:与对照组相比,实验组中CaCYC1基因的相对表达量显著下降49%,叶片中喜树碱的积累量显著下降35%。上述结果表明,本研究所构建的由TRV介导的VIGS体系可有效沉默内源基因的表达,CaCYC1基因可正向调控喜树叶片中喜树碱的生物合成。