志贺氏菌检测和分群实时荧光PCR方法的建立

编号 zgly0001693804

文献类型 期刊论文

文献题名 志贺氏菌检测和分群实时荧光PCR方法的建立

作者 王海艳  赵治国  催强  陈林军  延涵  郝广福  靳木子 

作者单位 呼和浩特海关 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年03期

年份 2020 

分类号 S852.61 

关键词 志贺氏菌  实时荧光PCR  检测和分群 

文摘内容 为对志贺氏菌属细菌进行快速、准确检测和分群鉴定,根据志贺氏菌invC、rfc、wbgZ和rfpB基因,分别设计引物和探针,建立了鉴定志贺氏菌属以及福氏志贺氏菌、宋内志贺氏菌和痢疾志贺菌氏菌实时荧光PCR方法,同时将根据ompA基因设计的引物和探针作为内参照,并通过特异性试验和人工接种试验等对该方法进行验证。结果显示,该方法对17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性;用增菌肉汤直接进行PCR检测,发现在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为1～3 cfu/25 g(mL),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤8 cfu/25 mL、12 cfu/25 g和≤12 cfu/25 g;分离培养后再对可疑菌落进行实时荧光PCR鉴定,发现所有样品的检出限为1～3 cfu/25 g(mL),与传统培养法检出限一致。结果表明,该实时荧光PCR方法是一个快速、敏感、特异的检测方法,适合于志贺氏菌的常规检测分析。