编号 zgly0000664426
文献类型 期刊论文
文献题名 松材线虫纤维素酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
学科分类 220.3020;森林昆虫学
作者单位 青岛大学生物系 南京林业大学森林资源与环境学院
母体文献 青岛大学学报: 工程技术版
年卷期 2011,26(1)
页码 59-65
年份 2011
分类号 Q936
关键词 松材线虫 纤维素酶 基因克隆 表达
文摘内容 采用PCR技术克隆了松材线虫纤维素酶的编码基因BXC46,克隆基因与已报道的纤维素酶基因BXC10(GenBank登录号: FJ598020.1)的同源性高达99%,将其克隆到表达载体pET-15b上构建了表达载体pET-15b-BXC。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株构建工程菌,SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导了纤维素酶在工程菌中表达。采用Ni2+-NTA树脂亲和层析部分纯化了重组松材线虫纤维素酶,DNS法进行的活性测定表明,部分纯化的重组蛋白具有纤维素酶的活性,其最适温度为45℃,最适pH为4.0。