光皮桦木质部cDNA-AFLP技术体系的建立及应用

编号 zgly0001436130

文献类型 期刊论文

文献题名 光皮桦木质部cDNA-AFLP技术体系的建立及应用

作者 江成  林二培  黄华宏  童再康 

作者单位 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S792.15 

关键词 光皮桦  cDNA-AFLP  木质化  基因表达 

文摘内容 为了挖掘光皮桦材性相关基因,本研究以光皮桦木质部为材料,通过对RNA的提取、cDNA的反转录及纯化的对比分析,以及选扩体系优化等,建立了相应的cDNA-AFLP体系。结果表明:采用CTAB和RNAiso试剂相结合的方法得到的RNA质量较好,cDNA经纯化后选扩效果明显变好。选扩体系为:4.0μL预扩产物(稀释40倍)、1.6μL的引物(10.0μmol/L)、0.2μL的dNTP(2.5 mmol/L)、0.4μL的Mg2+(25.0 mmol/L),以及0.2μL的Taq DNA聚合酶(5 U/μL)。进一步以来自不同木质化茎段的cDNA为模板,筛选出31对扩增效果较好的引物组合,同时分离出一些差异表达的基因片段,经测序后探讨了其在木质化发育过程中可能的功能。