亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响

编号 zgly0001371128

文献类型 期刊论文

文献题名 亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响

作者 曹泽磊  苏建民  胡广卫  王勇胜  唐爽  张涌 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2009年09期

年份 2009 

分类号 Q813 

关键词 亮甲酚蓝  牛  卵母细胞  体细胞核移植 

文摘内容 为探索用亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞是否有利于牛体细胞克隆胚的体外发育,将采集的卵母细胞分成3组:对照组,采集后的卵母细胞直接放入成熟液培养,不用亮甲酚蓝处理;控制对照组,卵母细胞于PBS中放置90 min后放入成熟液中培养;试验组,将采集的卵母细胞在含有26μmol/L亮甲酚蓝的PBS中放置90 min。然后将处理过的卵母细胞根据着色情况分为两组,即BCB+(胞质呈蓝色,成熟卵母细胞)和BCB-(胞质未着色,生长期卵母细胞)。各组卵母细胞24 h体外成熟培养,统计各组卵母细胞成熟率。分别用成熟后的各组卵母细胞用于细胞核移植,统计体细胞核移植的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数。结果表明,BCB+组卵母细胞的成熟率明显高于BCB-组卵母细胞的成熟率(74.0%,53.4%),差异显著(P<0.05)。BCB+组的囊胚率(45.0%)与对照组、控制对照组和BCB-组的囊胚率(34.9%,36.4%和5.2%)相比差异显著(P<0.05)。另外BCB+组的囊胚细胞总数(114.5±7.5)较其他组差异显著(P<0.05)。表明通过亮甲酚蓝染色法筛选出成熟的高质量牛卵母细胞用于体细胞核移植,可以获得更高的克隆囊胚率。