沙门氏菌LAMP可视化检测方法的建立

编号 zgly0001660285

文献类型 期刊论文

文献题名 沙门氏菌LAMP可视化检测方法的建立

作者 高志强  汪琳  张灿  任彤  赵相鹏  尹羿  蒲静  史雅然  刘凤华 

作者单位 北京检验检疫技术中心  中国人民解放军疾病预防控制所  北京农学院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2019年02期

年份 2019 

分类号 S852.61 

关键词 沙门氏菌  LAMP  可视化检测  检疫 

文摘内容 为实现沙门氏菌的快速现场检测,根据沙门氏菌invA基因编码区序列,设计合成1套引物,通过对反应物浓度和反应条件优化,建立了沙门氏菌属特异性LAMP检测方法;通过对invA基因8个区域的6条引物配对进行等温扩增,并在反应体系中加入HNB来指示反应结果,实现了反应的快速闭管检测。灵敏度试验显示,建立的方法可以检出稀释至3.6×10~1 CFU/mL菌液所提取的DNA;特异性试验显示,建立的方法与大肠杆菌DNA、志贺氏菌DNA、布鲁氏菌试管凝集抗原DNA、炭疽沉淀抗原DNA以及猪链球菌2型DNA不发生交叉反应,但能检出鸡白痢、禽伤寒沙门氏菌凝集抗原以及马流产试管凝集抗原提取的DNA;重复性试验显示,3个稀释度菌液DNA的3次重复检测均为阳性;应用试验显示,从经增菌培养的200份进境猴粪拭子样品中检出阳性2份,与细菌分离鉴定检测结果一致。结果表明,所建立的方法敏感性和特异性较高,重复性满足实际要求,可用于进境动物样品的沙门氏菌检测。