马铃薯甲虫N-β-丙酰多巴胺水解酶基因的克隆及功能分析

编号 zgly0001644160

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯甲虫N-β-丙酰多巴胺水解酶基因的克隆及功能分析

作者 杜晓燕  付开赟  徐晴玉  吐尔逊·阿合买提  丁新华  何江  郭文超 

作者单位 塔里木大学植物科学学院  新疆农业科学院植物保护研究所农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室  南京农业大学植物保护学院  新疆农业科学院微生物应用研究所 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2018年06期

年份 2018 

分类号 S435.32 

关键词 马铃薯甲虫  RNA干扰  NBAD水解酶  保幼激素  蜕皮激素 

文摘内容 【目的】通过RNAi技术分析明确对马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata黑色素形成重要的N-β-丙酰多巴胺(NBAD)水解酶基因的功能。【方法】NBAD水解酶基因通过马铃薯甲虫转录组数据分析和RT-PCR克隆获得,分别利用序列比对和系统发育分析确定该基因的完整性和系统发育;通过q PCR检测其在马铃薯甲虫各发育阶段和4龄幼虫不同组织及成虫精巢和卵巢中的表达量;采用喂食幼虫dsRNA的方法,观察该基因在马铃薯甲虫幼虫的生长发育过程中对体色的影响,并测定保幼激素和蜕皮激素对该基因表达的影响。【结果】克隆得到马铃薯甲虫NBAD水解酶基因,命名为Ldtan(Gen Bank登录号:KY221866),其编码蛋白的氨基酸序列与鞘翅目赤拟谷盗Tribolium castaneum和山松大小蠹Dendroctonus ponderosae同源蛋白的氨基酸序列的一致性最高,聚为一支。Ldtan在马铃薯甲虫4龄幼虫腹神经索(99.36±0.95)、后肠(17.79±3.11)和表皮(9.21±0.12)中的相对表达量较高;在幼虫期随幼虫生长发育表达量逐渐升高,在成虫期的表达量最高。通过喂食2龄幼虫Ldtan的dsRNA能有效降低靶标基因的表达量,使幼虫体色变深呈一定的棕褐色,并且具有一定的致死效应。通过RNAi技术干涉保幼激素合成和信号途径相关基因,发现Ldtan表达量降低,而干扰蜕皮激素合成和信号途径相关基因,Ldtan表达量增加。【结论】结果提示Ldtan参与了马铃薯甲虫的黑色素合成,并且蜕皮激素和保幼激素可能影响其表达。