编号
zgly0001334704
文献类型
期刊论文
文献题名
Zhangfei融合蛋白的纯化及其免疫效果
作者单位
西北农林科技大学动物医学院农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室
宝鸡市畜牧兽医中心
母体文献
西北农林科技大学学报(自然科学版
年卷期
2008年10期
年份
2008
分类号
S852.5
关键词
Zhangfei
融合蛋白
诱导表达
电洗脱
谷胱甘肽琼脂糖凝胶
抗体效价
文摘内容
【目的】纯化Zhangfei融合蛋白并检测其免疫原性,为研究其在生殖内分泌调节中的作用提供理论依据。【方法】通过大肠杆菌原核表达系统进行Zhangfei融合蛋白的表达,筛选出最佳诱导表达条件,采用SDS-PAGE凝胶检测Zhangfei融合蛋白的表达情况,比较谷胱甘肽琼脂糖凝胶和电洗脱2种纯化Zhangfei融合蛋白的方法,并测定纯化的Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠和家兔的效果。【结果】成功筛选出了表达Zhangfei融合蛋白的最佳诱导条件为IPTG终浓度3 mmol/L,诱导时间7 h;应用电洗脱方法可得到纯度较高的Zhangfei融合蛋白,其质量浓度为1.269 mg/mL,免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5×103以上,免疫兔的血清抗体效价高达1∶3×106。【结论】电洗脱纯化Zhangfei融合蛋白的方法优于谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化法,Zhangfei融合蛋白具有良好的免疫原性。