紫花苜蓿MsZIP基因超表达载体的构建及转基因苜蓿检测

编号 zgly0001624882

文献类型 期刊论文

文献题名 紫花苜蓿MsZIP基因超表达载体的构建及转基因苜蓿检测

作者 李燕  孙彦  杨青川  康俊梅  张铁军  房锋 

作者单位 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  中国农业大学动物科技学院  中国农业科学院植物保护研究所 

母体文献 草业学报 

年卷期 2012年06期

年份 2012 

分类号 S541.9 

关键词 紫花苜蓿  MsZIP基因  超表达载体  苜蓿转化  转基因苜蓿检测 

文摘内容 根据已经克隆得到的MsZIP基因(GenBank序列号:HQ911778),扩增编码区cDNA,构建植物超表达载体PBI-MsZIP。酶切鉴定表明,目的基因已经正确的插入到载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌菌株中,然后采用农杆菌介导的方法,转化紫花苜蓿,共得到11株抗性苗,对其中的4株进行卡那霉素基因PCR检测,均得到了目的条带。同时对这4株抗性苗进行目的基因的RT-PCR检测,均得到了目的条带。说明MsZIP基因已经成功在苜蓿中超表达。为了进一步验证该基因的功能,分别用200mmol/L NaCl和25μmol/LPEG-6000处理转基因苜蓿,3d后进行生理指标的测定。结果表明,MsZIP基因在苜蓿中超表达可以提高苜蓿的耐盐性和耐旱性。