李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测

编号 zgly0001486543

文献类型 期刊论文

文献题名 李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测

作者 刘跃庭  朱林慧  李培江  廖芳  任学毅  李关荣 

作者单位 西南大学  南方山地农业教育部工程研究中心  天津出入境检验检疫局  重庆市食品药品检验所 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2015年04期

年份 2015 

分类号 S436.62 

关键词 李属  检疫性真菌  丁香疫霉  栗黑水疫霉  三重PCR检测 

文摘内容 为建立我国禁止进境的2种检疫性真菌丁香疫霉Phytophthora syringae和栗黑水疫霉P.cambivora的同步分子检测方法,根据疫霉属的18S rRNA、HSP90和Ypt1基因分别设计通用引物、丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异性引物,建立三重PCR检测方法,并进行灵敏度测试和模拟带菌试验。结果表明,可同时检测李属植物上丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异三重PCR检测体系为:最佳引物浓度组合18SUF/18SUR、PCSF/PCSR和PSSF/PSSR依次为0.2、0.8、1.0μL,最佳退火温度为63℃,最佳退火时间为20 s。该体系扩增丁香疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和683 bp的HSP90基因特异条带,扩增栗黑水疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和314 bp的Ypt1基因特异条带,对照菌只出现18S rRNA条带;三重PCR反应体系检测灵敏度低于单重PCR;模拟带菌试验可同时扩增出3个片段。表明该三重PCR检测方法能实现丁香疫霉和栗黑水疫霉的同步特异性检测,可有效改进李属类水果及其种苗上检疫性疫霉的快速检测。