实时荧光定量PCR法检测十字花科细菌性黑斑病菌

编号 zgly0001526583

文献类型 期刊论文

文献题名 实时荧光定量PCR法检测十字花科细菌性黑斑病菌

作者 王道泽  张莉丽  陶中云  谢关林 

作者单位 浙江省杭州市植保土肥总站  湖州市出入境检验检疫局  浙江大学植物保护系 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S432.42 

关键词 十字花科黑斑病菌  常规PCR  实时荧光定量PCR  种子检测 

文摘内容 为有效防控我国的检疫性有害生物十字花科细菌性黑斑病菌Pseudomonas syringae pv.maculicola在国内的传播与蔓延,通过设计1对特异性引物3539,利用132株靶标和非靶标菌为模板进行PCR扩增,建立了实时荧光定量PCR法,并进行了模拟种子带菌试验。结果显示,引物3539为只针对十字花科细菌性黑斑病菌扩增出的特异性产物;在模拟种子带菌检测中,常规PCR对菌悬液的检测限为10~5CFU/m L,实时荧光定量PCR的检测限为10~3CFU/m L,其中10~8CFU/m L菌液的Ct值最低,为22.90,10~3CFU/m L菌液的Ct值最高,为35.73,且不同浓度菌液间的Ct值均有显著差异;不同带菌率模拟种子的检测结果表明,常规PCR和实时荧光定量PCR能检测到的带菌率分别为0.5%和0.1%。研究表明,实时荧光定量PCR法不仅可用于病种的检测,也可用于病害的早期诊断。