传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp5在真核细胞中的重组表达及鉴定

编号 zgly0001423450

文献类型 期刊论文

文献题名 传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp5在真核细胞中的重组表达及鉴定

作者 耿阳  牟小东  刘然  边葶苈  廖敏  周继勇 

作者单位 浙江大学农业部动物病毒学重点实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S852.65 

关键词 传染性支气管炎病毒  非结构蛋白5  Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 

文摘内容 本文以嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得IBV非结构蛋白5(non-structural protein,nsp5)基因片段后,构建了杆状病毒重组质粒IBVnsp5-Bacmid。IBVnsp5-Bacmid转染Sf9细胞,获得nsp5重组杆状病毒,经(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot检测到转染细胞表达的nsp5蛋白。进一步从感染的细胞中纯化重组蛋白,并用纯化的蛋白免疫小鼠制备了抗nsp5的多抗血清,该多抗血清可检测到IBV四川株SC021202感染的DF-1细胞中特异性的nsp5蛋白。结果表明IBV nsp5在Bac-to-Bac真核表达系统中获得了成功表达,而且具有良好的免疫原性和反应原性。