编号 zgly0000467520
文献类型 期刊论文
文献题名 紫叶李叶片总RNA提取方法的改进与比较
作者单位 东北林业大学园林学院 河北农业大学园林与旅游学院
母体文献 分子植物育种
年卷期 2006,4(5)
页码 721-725
年份 2006
分类号 S662.3
关键词 紫叶李 花青素 总RNA CTAB
文摘内容 从紫叶李叶片中提取高质量RNA是研究叶色相关基因表达调控的必要前提。实验室常用的RNA提取方法和RNA提取试剂盒有很多种, 每种方法只适合某些组织材料。对彩叶植物来说, 组织中的次生代谢物含量很高, 叶片中的花色素苷、多糖更是高质量核酸提取过程中难以去除的干扰成分。本文利用CTAB法、SDS法以及Trizol法从富含花青素类物质的彩叶植物紫叶李叶片中提取总RNA。电泳检测显示: CTAB法提取的总RNA其28S、18S条带清晰, 紫外光谱分析A260/A280比值为1.93, A260/A230比值为2.04, RNA产量可达141μg·g^-1·FW^-1而且通过RT-PCR扩增出了目的基因的cDNA片段, 说明利用此法分离的RNA纯度和浓度符合反转录PCR的要求, 而且能去除色素分子的干扰。SDS法提取的总RNA产量较低, 且纯度不高。而Trizol法很难从紫叶李中提出完整的RNA。因此CTAB法是一种从富含花青苷的紫叶李叶片中有效提取高质量总RNA的方法。