树状多节孢酸性磷酸酶的分离纯化与性质研究

编号 zgly0001411521

文献类型 期刊论文

文献题名 树状多节孢酸性磷酸酶的分离纯化与性质研究

作者 张国庆  王有志  王守现  王贺祥  陈青君 

作者单位 北京农学院农业部都市农业(北方)重点实验室  中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室  中国科学院微生物研究所菌种保藏中心  北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 Q814.1 

关键词 树状多节孢  酸性磷酸酶  性质  酶活性 

文摘内容 树状多节孢Nodulisporium sylviforme是从东北红豆杉Taxus cuspidata分离、可产生紫杉醇的内生真菌。研究以树状多节孢为材料,利用液体发酵手段获得菌丝体,通过CM-cellulose阴离子交换柱层析、Q-Sepharose阳离子交换柱层析和FPLC凝胶过滤层析(Superdex 75),获得纯化的树状多节孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。结合FPLC和SDS-PAGE分析,判定该磷酸酶为分子量44kDa单亚基蛋白。酶学性质研究表明,其最适pH值为3.0,最适温度为58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+对酶活有30%-50%的促进作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+对酶活有显著的抑制作用;当Fe2+浓度低于25mmol/L时表现为促进作用,但浓度达到50mmol/L时磷酸酶完全失活。