中国棉铃虫核型多角体病毒VHA273毒株的克隆及基因组物理图谱

编号 zgly0001166590

文献类型 期刊论文

文献题名 中国棉铃虫核型多角体病毒VHA273毒株的克隆及基因组物理图谱

作者 杨忠  黎路林  洪华珠  陈曲侯 

作者单位 华中师范大学昆虫学研究所 

母体文献 中国生物防治 

年卷期 1996年04期

年份 1996 

分类号 Q523.3 

关键词 中国  棉铃虫核型多角体病毒  DNA  物理图谱 

文摘内容 利用ＨＺ－ＩＢ３细胞对中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＮＰＶ）ＶＨＡ２７３毒株进行了三轮空斑纯化，得到一个克隆株Ｈ９。电镜观察表明，此克隆株Ｈ９为单粒包埋核型多角体病毒（ＳＮＰＶ）。Ｈ９的基因组ＤＮＡ经限制性内切酶ＢｇｌＩ，ＨｉｎｄⅢ，ＰｓｔＩ，ＸｈｏＩ，ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＫｐｎＩ，ＢｓｔＥⅡ完全酶切后分别产生１０，１３，７，６，２７，１１，６和１２条片段，以λＤＮＡ／ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ双酶切片段和ＨｉｇｈＭｏｌｅｃｕｌａｒＷｅｉｇｈｔＤＮＡＭａｒｋｅｒｓ为标准作工作曲线，求出了各限制性内切酶片段的大小。实验测得ＨａＮＰＶ－Ｈ９基因组的大小为１２９．９６ｋｂ，分子量为８５．７７×１０６，表明Ｈ９不同于其它已报道的ＨａＳＮＰＶ。利用单、双酶混合酶切分析和部分酶切分析，通过逻辑推导，完成了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ和ＸｈｏＩ各单酶解片段的重叠和延伸，最终构建了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ、ＸｈｏＩ的物理图谱