编号 zgly0001264957
文献类型 期刊论文
文献题名 苜蓿萎蔫病菌Taq Man探针实时荧光PCR检测方法的建立
作者单位 湖南农业大学植保学院 国家质检总局动植物检疫实验所 国家质检总局动植物检疫实验所 长沙410128 长沙410128 长沙410128
母体文献 植物检疫
年卷期 2003年05期
年份 2003
分类号 S435.4
关键词 Taq Man探针 实时荧光PCR 苜蓿萎蔫病菌 检测
文摘内容 苜蓿萎蔫病菌是我国对外检疫性二类有害生物 ,目前国内尚无发生。在出入境检验检疫中主要是采用生物学和血清学方法进行检测 ,劳动强度大 ,耗费时间长。根据苜蓿萎蔫病菌与其它细菌菌株 1 6SrDNA序列差异 ,设计出对苜蓿萎蔫病菌具有稳定点突变特异性探针 ,利用该探针对棒形杆菌属 4个种及其它属细菌进行了实时荧光PCR检测实验。结果表明 ,只有苜蓿萎蔫病菌能检测到荧光信号 ,其它细菌没有荧光产生。该方法特异性强 ,灵敏度高 ,能检测到 2 1 4fg质粒DNA ,比常规PCR灵敏 1 0 0倍 ,而且整个过程只需要 2~ 3h。该方法可有效地应用于进出境病原菌检测之中。