应用Super SMART cDNA合成技术扩增油松胚珠总RNA

编号 zgly0001374071

文献类型 期刊论文

文献题名 应用Super SMART cDNA合成技术扩增油松胚珠总RNA

作者 徐利利  吕坤  郑彩霞  赵百慧 

作者单位 北京林业大学林木育种国家工程实验室  林木花卉遗传育种教育部重点实验室  国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室  北京林业大学生物科学与技术学院 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S791.254 

关键词 RNA  Super SMART cDNA合成  油松  雌性不育 

文摘内容 以油松雌性不育突变体和具有相似遗传背景可育系的胚珠为材料,用Plant RNA assistant kit试剂盒提取油松总RNA,采用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第l链,优化扩增第2链,通过设置梯度PCR扩增循环数,电泳分析后鉴定cDNA质量,采用定量法评估其扩增效率。可育系和不育系各1μg总RNA分别成功扩增出46.06和43.59μg纯化的双链cDNA,质量及纯度较高。此方法的应用解决了研究材料有限的问题,可由微量的胚珠总RNA扩增出足够多的高质量双链cDNA,为今后抑制性消减杂交文库的构建奠定基础。