编号 zgly0001528930
文献类型 期刊论文
文献题名 油茶脂肪酸β氧化多功能蛋白基因的克隆与原核表达
作者单位 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室 国家林业局桉树研究开发中心 广西林业科学研究院 华中师范大学生命科学学院
母体文献 分子植物育种
年卷期 2016年06期
年份 2016
分类号 S794.4
关键词 油茶 多功能蛋白 克隆 载体构建 原核表达
文摘内容 油茶是中国重要的木本食用油料树种,在油茶种子的发育过程中,涉及到一系列调控代谢过程的酶和基因,脂肪酸β氧化多功能蛋白(MFP)是β氧化系统上的一类酶,它完成催化β-氧化途径中的水合与脱氢过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上,采用RACE技术,克隆到油茶脂肪酸β氧化多功能蛋白基因的cDNA全长序列,命名为CoMFP(Gen Bank登录号为KJ910342)。序列分析表明,该基因cDNA全长为2 541 bp,含有2 178 bp的开放读码框,编码725个氨基酸,分子量为79.033 3 kD,理论等电点pI为9.11,具有六个比较明显的跨膜区,不仅存有反式烯酰CoA水合酶(ECH)信号序列、3羟酰Co A脱氢酶(HCDH)信号序列、ECH基序和磷酸结合基序,也具有相当保守的盐桥、活性位点及五个亚结构域。成功地构建了原核表达载体并在宿主细胞BL21(DE3)上成功诱导表达,获得表观分子量约为79 kD的相应目的蛋白。