利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究

编号 zgly0001527728

文献类型 期刊论文

文献题名 利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究

作者 查琳  王伟东  续晨  诸葛强 

作者单位 南京林业大学南方现代林业协同创新中心  无锡市林木种苗管理站  南京晓庄学院生命科学系 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S792.11 

关键词 PMI  选择标记  南林895杨  转基因体系  抗虫 

文摘内容 [目的]利用不同于抗生素的PMI为选择标记基因的遗传转化体系,对杨树进行双抗虫基因（Bt和Cp TI）的转基因研究。建立杨树以PMI为安全标记基因的转基因体系,为安全、高效的林木转基因育种研究提供实验依据。[方法]选择已有的转Cp TI抗虫基因（利用Kmr选择标记获得）的美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨（Populus×euramericana‘Nanlin895’）为受体材料,对杨树叶片、叶片分化芽、茎段生根的甘露糖敏感性等筛选优化,采用农杆菌介导的方法进行双抗虫基因的研究。[结果]较为适合的杨树叶片筛选培养基为:甘露糖8 g·L-1和蔗糖22 g·L-1;叶片分化芽筛选培养基为:甘露糖10 g·L-1和蔗糖20 g·L-1;茎段生根筛选培养基:甘露糖8 g·L-1和蔗糖22 g·L-1。在此基础上,获得了转Bt和Cp TI双抗虫基因的植株8株。[结论]初步建立了以PMI为安全标记基因的杨树转基因体系:确定了PMI筛选的最适选择压,成功构建了含PMI选择标记基因的植物抗虫表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化最终获得了转双抗虫基因植株。