蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究

编号 zgly0000564387

文献类型 期刊论文

文献题名 蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 杨波  董小敏  蔡大威  刘志刚  胡征  汪浩勇  张珈敏  胡远扬 

作者单位 湖北工业大学生物技术系  武汉大学病毒学国家重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2008,51(5)

页码 486-491

年份 2008 

分类号 Q965.9 

关键词 蟑螂浓核病毒  启动子  反式激活  昆虫细胞  表达载体 

文摘内容 为了研究蟑螂Periplaneta fuliginosa浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制，用PCR的方法从蟑螂浓核病毒基因组DNA中扩增了非结构蛋白基因ns3翻译起始密码子上游325bp的启动子序列；并进一步以其作为模板，利用聚合酶链式反应技术，得到6个不同长度的启动子片段和两个定点突变体片段，构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒，在脂质体介导下转染多种昆虫细胞，体外分析了该启动子的活性。结果表明：该325bpDNA片段在Sf2，S2，Tn368及Ld652细胞中均具有较高的启动子活性；其转录起始基序CAGT对维持该启动子的基本转录活性而言是必需的，而TATA盒对此则是非必需的，但它的存在可显著提高启动子的转录活性。同时，我们还发现，病毒非结构蛋白NS1对该启动子具有反式激活作用，并且这种激活作用的大小取决于NS1蛋白在细胞中的浓度。