团头鲂促性腺激素GtHⅡβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建

编号 zgly0000703703

文献类型 期刊论文

文献题名 团头鲂促性腺激素GtHⅡβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 曲宪成  崔严慧  周正峰  曲学伟  金一春  胡萍华  尚晓莉  程翠  张开岳  张勇  蒋骄云 

作者单位 上海海洋大学水产与生命学院  烟台市牟平区渔业技术服务中心 

母体文献 中国水产科学 

年卷期 2010,17(4)

页码 649-658

年份 2010 

分类号 Q959 S96 

关键词 团头鲂  促性腺激素Ⅱβ亚基  5′侧翼序列  启动子  表达载体 

文摘内容 利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示: 克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40～10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771～+40bp)、601bp(-561～+40bp)、386bp(-346～+40bp)、239bp(-199～+40bp)和98bp(-58～+40bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据。