PCR反应的动力学模拟和相关因素对扩增结果的影响

编号 zgly0000520580

文献类型 期刊论文

文献题名 PCR反应的动力学模拟和相关因素对扩增结果的影响

作者 罗睿  郭建军 

作者单位 贵州大学生命科学院  贵州大学昆虫研究所 

母体文献 贵州大学学报：自然科学版 

年卷期 2007,24(6)

页码 653-660

年份 2007 

分类号 Q95-336 

关键词 PCR动力学  PCR优化  引物  数字模拟 

文摘内容 PCR技术建立二十年以来，它已经成为生物学实验室不可缺少的一部分。但因为其影响因素多、反应过程比较复杂，到今天为止它还是一个具有某种程度经验性的方法。我们从PCR反应的基本动力学过程分析出发，通过每一轮扩增循环的分析描述了产物的积累过程，在此基础上建立了反应的迭代动力学模型。通过该模型我们模拟了反应使用的模板量、扩增循环数、酶的使用量、酶的半衰期、以及每一轮扩增中变性时间对扩增结果的影响。进一步，我们对模板使用量、扩增循环数、酶的使用量对扩增结果的影响进行了实验验证和探讨；混合模板对扩增结果的影响也同时做了探讨。模拟和实验的结果表明：常规的PCR实验中使用中等偏低的模板量，选择较好的聚合酶同时使用合适的酶量，通过较低循环数的扩增就能得到较为满意的结果。PCR实验的成败最大的限制因素是实验准备过程中引物的设计，而实验过程中的调整优化只能起辅助作用。