大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

编号 zgly0001299911

文献类型 期刊论文

文献题名 大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

作者 成大荣  徐建生  王秋娟  孙怀昌  高崧 

作者单位 扬州大学兽医学院  扬州大学兽医学院 江苏扬州225009  江苏扬州225009  江苏扬州225009 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2005年06期

年份 2005 

分类号 S852.61 

关键词 大肠杆菌  菌毛  F18  FedA/ac  表达  鉴定 

文摘内容 根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A 中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX 6p 1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21 获得重组菌PPFedA/ac。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致。通过对菌体裂解物的SDS PAGE 分析以及Western blotting 鉴定,证明重组大肠杆菌PP FedA/ac的可以表达融合蛋白形式的FedA/ac (命名为GST FedA/ac),即FedA/ac蛋白(15.317 ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335 ku)相连组成分子量为42.652 ku的融合蛋白。利用GST FedA/ac制备的兔抗GST FedA/ac 血清与大肠杆菌F107/86 株( F18ab+ )、2 134 P 株(F18ac+)进行的玻板凝集试验呈现阳性反应,进一步表明了表达的正确性。