细菌表达dsRNA介导的家蚕FTZ-F1基因的RNA干扰

编号 zgly0001399326

文献类型 期刊论文

文献题名 细菌表达dsRNA介导的家蚕FTZ-F1基因的RNA干扰

作者 王根洪  祝慧敏  罗会松  王轲轲  杨小波  蒋亮  夏庆友 

作者单位 重庆大学农学及生命科学研究院  西南大学生物技术学院农业部蚕桑学重点开放实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 Q963  Q78 

关键词 家蚕  RNA干扰  双链RNA  L4440质粒  HT115细菌株  变态发育 

文摘内容 为探索细菌表达目标基因dsRNA介导的RNAi技术是否在家蚕Bombyx mori可行,本研究引入了在其他物种中广泛应用的细菌表达dsRNA的RNAi系统:HT115细菌株和L4440质粒。利用L4440载体两端含有T7启动子的特点,设计并构建了针对家蚕核受体FTZ-F1基因的RNA干扰(RNA interference)载体,将构建好的质粒转入大肠杆菌Escherichia coliHT115,在IPTG诱导下成功获得目标基因对应双链RNA(dsRNA)。结果显示:通过对5龄第7天家蚕幼虫注射IPTG诱导后提取的FTZ-F1基因对应的dsRNA25μg,85%的蛹变态发育过程明显延迟,不能实现幼虫到蛹的形态完全转变。荧光定量PCR分析显示目标基因的表达得到了特异的抑制。实验结果初步表明,通过细菌表达目标基因dsRNA介导的RNAi策略,以其经济、高效的特点,具有广泛应用于家蚕基因功能研究中的潜力。