黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定

编号 zgly0000472274

文献类型 期刊论文

文献题名 黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 段云  邓小娟  叶明强  杨婉莹  黄亚东  温硕洋  曹阳 

作者单位 华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系  暨南大学医药生物技术研究开发中心  华南农业大学资源与环境学院昆虫学系 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2006,49(5)

页码 747-753

年份 2006 

分类号 Q966 

关键词 黑腹果蝇  抗真菌肽  原核表达  可溶性表达  抗真菌活性 

文摘内容 Drosomycin(Drs)是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性。但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外, 在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列, 其中同系物Drosomycin-lC(Drs-lC)的抗真菌谱仅次于Drs。将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因(Drs-lC)进行可溶性表达, 对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景。本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白(Trx)融合表达载体pThiohis A中, 转化宿主菌TOP10, 进行可溶性表达, 并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化。结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达, 可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22%。2种融合蛋白的表达产物经Ni—NTA亲和层析得到纯化。生测结果表明, 2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性。