绵羊IGF-1基因慢病毒表达载体的构建及其促肌细胞生长作用研究

编号 zgly0000890419

文献类型 期刊论文

文献题名 绵羊IGF-1基因慢病毒表达载体的构建及其促肌细胞生长作用研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 安静  张雪梅  刘晨曦  刘明军 

作者单位 新疆畜牧科学院生物技术研究中心  新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室  农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室  新疆农业大学农学院 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2014(4)

页码 15-21

年份 2014 

关键词 绵羊IGF-1基因  慢病毒表达载体  细胞生长曲线 

文摘内容 【目的】克隆绵羊IGF-1基因CDS区,构建绵羊IGF-1基因慢病毒表达载体,分析IGF-1基因在绵羊成肌细胞增殖过程中的作用。【方法】提取绵羊肝组织总RNA,通过RT-PCR方法获得IGF-1全长CDS序列,经测序鉴定后与慢病毒载体pLEX-mcs连接,构建pLEX-IGF-1慢病毒重组表达质粒,并在293T细胞中进行病毒包装和生产。分离培养绵羊原代成肌细胞,并用重组慢病毒使其感染,建立稳定转染pLEX-IGF-1的绵羊成肌细胞系。通过绘制细胞生长曲线,分析过表达IGF-1对绵羊成肌细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期变化。【结果】克隆获得长518bp的IGF-1CDS区序列。