人表皮干细胞在不同培养基中生长状态的观察及其生物学性状的初步探讨

编号 zgly0000409116

文献类型 期刊论文

文献题名 人表皮干细胞在不同培养基中生长状态的观察及其生物学性状的初步探讨

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 董蕊  金岩  刘源  聂鑫  王新文  赵宇 

作者单位 第四军医大学口腔医学院口腔组织病理学教研室  第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心 

母体文献 中国生物学文摘 

年卷期 2006,20(6)

页码 41-41

年份 2006 

分类号 Q962  Q813 

关键词 人表皮干细胞  生物学性状  生长状态  初步探讨  碱性成纤维细胞生长因子  流式细胞仪分析  流式细胞仪检测  factor  无血清培养基  细胞生长曲线  体外培养扩增  透射电镜观察  bFGF  FAD  角质化细胞MTT检测  细胞特性  不同浓度丝裂霉素 

文摘内容 目的筛选合适的保持人表皮干细胞特性的体外培养基, 并观察其生物学性状。方法按不同培养基分组, 配制FAD培养基和FAD加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的培养基, 即FAD、FAD1、FAD2、FAD3等组, 以及角质化细胞专用无血清培养基(keratinocyte-SFM, K-SFM), 同时应用同一个体的成纤维细胞经丝裂霉素处理后作滋养层, 培养人表皮干细胞。通过细胞生长曲线及MTT检测, 观察细胞的生长状态。在体外培养扩增表皮干细胞后, 利用透射电镜、流式细胞仪分析、BrdU检测, 观察细胞的生长状态; 结合流式细胞仪分析, 观察细胞周期的变化。结果人表皮干细胞在FAD组中生长良好, 加入bFGF可进一步改善细胞的生长状态。扩增后细胞检测提示, 人表皮干细胞在体外培养过程中呈典型的克隆性生长, 生长周期长。流式细胞仪检测表明, 人表皮干细胞80.2%处于G0/G1期; 透射电镜观察见其细胞器少, 细胞核浆比大。结论加入bFGF的FAD培养基并同时利用滋养层, 更适合人表皮干细胞的生长。在稳定状态下是一种处于静止期的幼稚细胞。