转植酸酶基因家蚕的制作及表达检测

编号 zgly0001360688

文献类型 期刊论文

文献题名 转植酸酶基因家蚕的制作及表达检测

作者 李春峰  黄科  甘进锋  蒙炳超  李智  夏庆友  周泽扬 

作者单位 西南大学蚕学与系统生物学研究所  农业部蚕桑学重点实验室  重庆师范大学 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2009年07期

年份 2009 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  转基因蚕  piggyBac  转基因  绿色荧光蛋白  植酸酶 

文摘内容 家蚕Bombyxmori丝腺具有高效合成蛋白质的特性,开发在丝腺特异表达外源蛋白质的生物反应器具有重要的意义。本研究利用piggyBac来源的两种载体pPIGA3GFP和pBac{3×P3-EGFPaf},建立了稳定的家蚕转基因技术体系;然后,利用一株黑曲霉来源的植酸酶基因,构建了在家蚕后部丝腺特异表达的融合表达载体pBac[3×P3-EGFP+FibLphyADsRed],注射蚕卵后,在53个G1蛾区中检测到3个有荧光蚕的蛾区。经Southern blot和反向PCR验证,转基因表达盒整合到家蚕染色体上。RT-PCR结果显示,植酸酶基因特异性地在后部丝腺表达,其表达模式与家蚕轻链丝素基因一致。结果表明我们成功获得了在后部丝腺特异表达植酸酶融合蛋白的转基因蚕,这为进一步开发家蚕生物反应器,利用转基因蚕生产各种重组蛋白具有积极的促进作用。