利用突变的绿色荧光蛋白基因为标记构建新型克隆载体

编号 zgly0001210818

文献类型 期刊论文

文献题名 利用突变的绿色荧光蛋白基因为标记构建新型克隆载体

作者 董越梅  李久蒂  朱至清 

作者单位 中国科学院植物研究所 

母体文献 植物学报 

年卷期 1999年05期

年份 1999 

分类号 Q785 

关键词 绿色荧光蛋白基因  GFPmut2  pBluescriptSK（＋）  克隆载体 

文摘内容 将三位点替换突变的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ＿Ｓ６５Ｔ、Ｖ６８Ｌ、Ｓ７２Ａ）基因插入到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＸｂａⅠ和ＳａｃⅠ之间，构建为新型的克隆载体ｐＧｒｅｅｎＬＤ。此质粒载体在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达后使菌落在日光下呈现黄绿色，而在长波紫外光照射下呈现亮绿荧光，当外源ＤＮＡ片段插入该载体的多克隆位点使ｇｆｐ基因表达受阻时，转化的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落为白色。因此可以用Ｅ．ｃｏｌｉ菌落黄绿色／绿色荧光的消失作为检测指标来筛选含有重组质粒的克隆。